酶標(biāo)儀使用時(shí)為什么要用雙波長(zhǎng)？

酶標(biāo)儀使用時(shí)為什么要用雙波長(zhǎng)？而檢定時(shí)又要用單波長(zhǎng)？

劉老師我也遇到這個(gè)問(wèn)題，我是這樣考慮的，您看看對(duì)不對(duì)。我們檢定時(shí)用的濾光片的標(biāo)準(zhǔn)值是用分光光度計(jì)在固定的波長(zhǎng)下檢定得出的，所以在檢定酶標(biāo)儀的時(shí)候是用單波長(zhǎng)的。。  而酶標(biāo)儀在使用的時(shí)候采用雙波長(zhǎng)是為了使數(shù)據(jù)穩(wěn)定。。   您覺(jué)得這個(gè)說(shuō)法對(duì)嗎？

您好：劉老師我想請(qǐng)教一下酶標(biāo)儀標(biāo)準(zhǔn)值A(chǔ)s和標(biāo)稱值有什么關(guān)系嗎？標(biāo)準(zhǔn)值怎嗎得來(lái)的。是檢測(cè)得來(lái)的嗎？

劉老師請(qǐng)問(wèn)一下，我們買的是濾光片檢定酶標(biāo)分析儀，但是老板又買了96孔酶標(biāo)板，這兩個(gè)有關(guān)聯(lián)嗎？

山東宏家 發(fā)表于 2019-7-30 14:40
劉老師請(qǐng)問(wèn)一下，我們買的是濾光片檢定酶標(biāo)分析儀，但是老板又買了96孔酶標(biāo)板，這兩個(gè)有關(guān)聯(lián)嗎？ ...

濾光片要放在96孔酶標(biāo)板上之后再去校準(zhǔn)儀器的，不然你的濾光片固定不到儀器里面去。

酶標(biāo)儀在實(shí)際使用中通常采用雙波長(zhǎng)形式（即參照波長(zhǎng)和檢測(cè)波長(zhǎng)，有的儀器上也叫主波長(zhǎng)和次波長(zhǎng)），最顯著的原因就是在于雙波長(zhǎng)測(cè)定樣本吸光度的準(zhǔn)確性、精密度都優(yōu)于單波長(zhǎng)檢測(cè)。而實(shí)際檢定使用單波長(zhǎng)首先是出于所使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（中性濾光片）相比實(shí)際檢測(cè)的被測(cè)樣品有更好的均勻性、顏色均勻，幾乎不存在裂紋啊、條紋啊、氣泡或者斑點(diǎn)等干擾因素，也不易受污染和輻射。中性濾光片在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)有相對(duì)恒定的吸光度（不像檢測(cè)標(biāo)本一樣存在特點(diǎn)波長(zhǎng)的吸收峰），且在檢定點(diǎn)波長(zhǎng)處定了值，有著明確的吸光度標(biāo)稱值。綜上所述，實(shí)際檢定采用單波長(zhǎng)測(cè)定吸光度由于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的干擾遠(yuǎn)小于實(shí)際樣本，已經(jīng)能夠較為準(zhǔn)確的測(cè)量出酶標(biāo)儀吸光度示值誤差。當(dāng)通過(guò)不同波長(zhǎng)各個(gè)檢定點(diǎn)的檢定，確定單波長(zhǎng)檢測(cè)下的吸光度示值誤差符合要求時(shí)，使用雙波長(zhǎng)進(jìn)行實(shí)際檢測(cè)的準(zhǔn)確性也能從計(jì)量器具本身性能處得到保障。至于實(shí)際檢測(cè)出來(lái)的數(shù)據(jù)準(zhǔn)不準(zhǔn)就不好說(shuō)，實(shí)際檢測(cè)的空白、陰陽(yáng)標(biāo)本對(duì)照、樣本處理、試劑等等都對(duì)實(shí)際檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生很大的影響。這也是我們現(xiàn)在除了計(jì)量檢定/校準(zhǔn)外，醫(yī)療機(jī)構(gòu)自身更為重視、也反復(fù)強(qiáng)調(diào)的質(zhì)控問(wèn)題。

vvliu2000 發(fā)表于 2019-7-31 17:54
酶標(biāo)儀在實(shí)際使用中通常采用雙波長(zhǎng)形式（即參照波長(zhǎng)和檢測(cè)波長(zhǎng)，有的儀器上也叫主波長(zhǎng)和次波長(zhǎng)），最顯著的 ...

非常感謝你給我回復(fù)！該帖子是我發(fā)表于 2016-9-21，后來(lái)我經(jīng)過(guò)學(xué)習(xí)，對(duì)該問(wèn)題有了了解：

       從酶標(biāo)儀光路可知，檢測(cè)的光束是垂直經(jīng)過(guò)待測(cè)標(biāo)本的，待測(cè)標(biāo)本的上表面是敝開(kāi)的，由于表面張力等原因，它不可能是規(guī)則平面，這樣檢測(cè)用光經(jīng)過(guò)待測(cè)樣本的光程難以恒定，自然會(huì)使測(cè)量精密度差。所以中檔以上的酶標(biāo)儀，基本上都會(huì)采用雙波長(zhǎng)比色功能。所謂雙波長(zhǎng)功能是指酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)如630nm（此時(shí)樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零）下各測(cè)定一次，取兩次測(cè)得值之差為測(cè)量結(jié)果。這樣能明顯提高測(cè)量的準(zhǔn)確度和精密度。
      而檢定時(shí)用單波長(zhǎng)，其道理就顯而易見(jiàn)了。

smile舞狼 發(fā)表于 2019-7-30 17:22
濾光片要放在96孔酶標(biāo)板上之后再去校準(zhǔn)儀器的，不然你的濾光片固定不到儀器里面去。 ...

濾光片放不進(jìn)去96孔酶標(biāo)板啊

山東宏家 發(fā)表于 2019-8-9 14:17
濾光片放不進(jìn)去96孔酶標(biāo)板啊

買片時(shí)候上面有個(gè)架子和96孔酶標(biāo)板一樣大就是用來(lái)放濾光片的

smile舞狼 發(fā)表于 2019-7-30 17:22
濾光片要放在96孔酶標(biāo)板上之后再去校準(zhǔn)儀器的，不然你的濾光片固定不到儀器里面去。 ...

不對(duì)吧，濾光片(有一個(gè)固定外殼)能放到96孔板上方？應(yīng)該是一個(gè)專門放濾光片的專用板吧，

gonglex 發(fā)表于 2017-2-8 11:04
劉老師我也遇到這個(gè)問(wèn)題，我是這樣考慮的，您看看對(duì)不對(duì)。我們檢定時(shí)用的濾光片的標(biāo)準(zhǔn)值是用分光光度計(jì)在固 ...

我覺(jué)得這個(gè)說(shuō)法是對(duì)的，因?yàn)樾?zhǔn)檢定的時(shí)候使用的標(biāo)準(zhǔn)器溯源是在單波長(zhǎng)下的值，所以條件要保持一致吧，這樣誤差才可靠