酶標(biāo)儀靈敏度指標(biāo)中吸光度值一般多少？

根據(jù)規(guī)程JJG 861-2007酶標(biāo)分析儀檢定規(guī)程，靈敏度≥0.01，所用濃度為5mg/L，則測(cè)得的吸光度不得小于0.05。

我偷懶，沒(méi)有做過(guò)這個(gè)指標(biāo)，也沒(méi)配過(guò)這個(gè)溶液。

只能參照【楊青成，酶標(biāo)儀校準(zhǔn)方法探討，臨床血液學(xué)雜志，2011，２4（４）】中，溶液厚度為5mm、濃度為0.0313%的重鉻酸鉀吸光度值是0.222，則假設(shè)厚度相同，換算成5mg/L重鉻酸鉀濃度時(shí)吸光度為0.0035，算出靈敏度0.0007，與規(guī)程差的太遠(yuǎn)。即使假設(shè)規(guī)程中樣品溶液厚度達(dá)到1cm，吸光度也才增加1倍。

問(wèn)題出在哪呢？不知道有哪位測(cè)過(guò)？麻煩告訴我個(gè)大概值，謝謝！

回復(fù) 1# ofooo


沒(méi)人回復(fù)，自己頂一個(gè)吧
從理論和時(shí)間表明，規(guī)程給出的指標(biāo)≥0.01/（mg/L）的指標(biāo)是錯(cuò)的，應(yīng)該更改為≥0.01Abs
根據(jù)【馬萱，分光光度計(jì)波長(zhǎng)誤差及靈敏度校核初探，武漢工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估計(jì)是1cm）
規(guī)程中假設(shè)液層厚0.5cm，濃度為5mg/L，則A=ebc=0.0055*5/2=0.014
當(dāng)然，實(shí)際液層厚度可能大于0.5cm，但一般不會(huì)高于1cm，所以理論吸光度值在0.014-0.028之間
實(shí)測(cè)某兩臺(tái)酶標(biāo)靈敏度結(jié)果是0.015和0.012左右

回復(fù)  ofooo


沒(méi)人回復(fù)，自己頂一個(gè)吧
從理論和時(shí)間表明，規(guī)程給出的指標(biāo)≥0.01/（mg/L）的指標(biāo)是錯(cuò)的，應(yīng)該更改為≥0.01Abs
根據(jù)【馬萱，分光光度計(jì)波長(zhǎng)誤差及靈敏度校核初探，武漢工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估計(jì)是1cm）
規(guī)程中假設(shè)液層厚0.5cm，濃度為5mg/L，則A=ebc=0.0055*5/2=0.014
當(dāng)然，實(shí)際液層厚度可能大于0.5cm，但一般不會(huì)高于1cm，所以理論吸光度值在0.014-0.028之間
實(shí)測(cè)某兩臺(tái)酶標(biāo)靈敏度結(jié)果是0.015和0.012左右ofooo 發(fā)表于 2013-3-27 20:15

張博：
1、你復(fù)述的靈敏度要求是≥0.01mg/L，還是≥0.01L/mg？規(guī)程給出的可是≥0.01L/mg。
2、你說(shuō)的實(shí)測(cè)某兩臺(tái)酶標(biāo)靈敏度結(jié)果是0.015和0.012左右，是0.015和0.012左右L/mg；還是0.015和0.012左右Abs？

回復(fù) 3# 劉彥剛


    規(guī)程寫(xiě)的是≥0.01Abs/（mg/L），我認(rèn)為是≥0.01Abs就行了
   實(shí)測(cè)值是0.015Abs和0.012Abs

《酶標(biāo)分析儀》檢定規(guī)程的修訂說(shuō)明和實(shí)驗(yàn)報(bào)告.pdf (314.62 KB, 下載次數(shù): 106)

2013-3-28 08:34 上傳

點(diǎn)擊文件名下載附件
《酶標(biāo)分析儀》檢定規(guī)程的修訂說(shuō)
下載積分: 金幣 -1

好不容易搞到一篇文獻(xiàn)：《酶標(biāo)分析儀》檢定規(guī)程的修訂說(shuō)明和實(shí)驗(yàn)報(bào)告
里面竟然沒(méi)有靈敏度的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，被“節(jié)選”掉了！！！

回復(fù)  劉彥剛


    規(guī)程寫(xiě)的是≥0.01Abs/（mg/L），我認(rèn)為是≥0.01Abs就行了
   實(shí)測(cè)值是0.015Abs和0.012 ...
ofooo 發(fā)表于 2013-3-28 08:05

    當(dāng)時(shí)我看該規(guī)程時(shí)就覺(jué)得這靈敏度指標(biāo)有點(diǎn)不好理解，后問(wèn)到了參加了宣貫的老師說(shuō)，此處規(guī)程沒(méi)表達(dá)好。據(jù)說(shuō)是測(cè)得的吸光度除以濃度5mg/L，所以靈敏度的單位成了L/mg。

好不容易搞到一篇文獻(xiàn)：《酶標(biāo)分析儀》檢定規(guī)程的修訂說(shuō)明和實(shí)驗(yàn)報(bào)告
里面竟然沒(méi)有靈敏度的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，被“ ...
ofooo 發(fā)表于 2013-3-28 08:36

      昨天我向理化計(jì)量的資深老師請(qǐng)教了該問(wèn)題，老師的指導(dǎo)給了我啟示，使我有了新的思路。后經(jīng)整理我覺(jué)得有點(diǎn)思路：這下讓我真正理解了為什么在給定波長(zhǎng)，測(cè)量給定的重鉻酸標(biāo)液，測(cè)得的結(jié)果不能用準(zhǔn)確度來(lái)量度，而只能用靈敏度量度。因?yàn)樽⒃诿笜?biāo)板上的被測(cè)溶液的液層厚度，不向比色皿那樣固定，所以即使儀器是很準(zhǔn)確的，也無(wú)法測(cè)得確定的值。
      而且，因?yàn)槭艿絾l(fā)。對(duì)于我們的問(wèn)題也得到了些想法：因?yàn)樵诿笜?biāo)板上的被測(cè)溶液，也不向比色皿裝著那樣是固定立方體，從某種意義上講，它相當(dāng)于或是凸鏡、或許是凹鏡的透鏡。這樣一定會(huì)偏離朗伯—比爾定律，或許就使吸光度大了。你說(shuō)有點(diǎn)道理嗎？

回復(fù)  劉彥剛


    規(guī)程寫(xiě)的是≥0.01Abs/（mg/L），我認(rèn)為是≥0.01Abs就行了
   實(shí)測(cè)值是0.015Abs和0.012 ...
ofooo 發(fā)表于 2013-3-28 08:05

    如果實(shí)測(cè)值是 實(shí)測(cè)值是0.015L/mg和0.012L/mg，就說(shuō)明我們的想法是對(duì)的；規(guī)程給出的指標(biāo)和規(guī)程宣貫時(shí)，給出的檢定方法也是對(duì)的。

實(shí)際上我們并沒(méi)有測(cè)出靈敏度0.015L/mg和0.012L/mg，而僅僅是按規(guī)程方法檢測(cè)的吸光度值是0.015和0.012，所以規(guī)程還是有問(wèn)題。

靈敏度=吸光值/濃度

今天剛好遇見(jiàn)這個(gè)問(wèn)題，看了大家的解答，我的想法是如果規(guī)程是正確的，靈敏度、吸光度和濃度應(yīng)該存在某種換算關(guān)系，就像6樓和10樓說(shuō)的這樣，現(xiàn)在也有標(biāo)準(zhǔn)玻片替代標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)備廠商說(shuō)原理是一樣的。

我也買了標(biāo)準(zhǔn)濾光片，下次檢定點(diǎn)時(shí)候用上。

我現(xiàn)在也在為這個(gè)問(wèn)題困擾