752型分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)原理與使用方法

752型分光光度計(jì)為紫外光柵分光光度計(jì)，測(cè)定波長(zhǎng)200nm～800nm。

1.結(jié)構(gòu)原理
752型分光光度計(jì)由光源室、單色器、樣品室、光電管暗盒、電子系統(tǒng)及數(shù)字顯示器等 部件組成，儀器的工作原理如圖Ⅱ-5-14所示。 儀器內(nèi)部光路系統(tǒng)如圖Ⅱ-5-15所示。 從鎢燈或氫燈發(fā)出的連續(xù)輻射經(jīng)濾色片選擇聚光鏡聚光后投向單色器進(jìn)狹縫，此狹縫正好位 于聚光鏡及單色器內(nèi)準(zhǔn)直鏡的焦平面上，因此進(jìn)入單色器的復(fù)合光通過(guò)平面反射鏡反射及準(zhǔn) 直鏡變成平行光射向色散光柵。光柵將入射的復(fù)合光通過(guò)衍射作用形成按照一定順序均勻排 列的連續(xù)單色光譜，此時(shí)單色光譜重新返回到準(zhǔn)直鏡，然后通過(guò)聚光原理成像在出射狹縫上 。出射狹縫選出指定帶寬的單色光通過(guò)聚光鏡落在試樣室被測(cè)樣品中心，樣品吸收后透射的 光經(jīng)光門射向光電管陰極面。根據(jù)光電效應(yīng)原理，會(huì)產(chǎn)生一股微弱的光電流。

此光電流經(jīng)電 流放大器放大，送到數(shù)字顯示器，測(cè)出透光率或吸光度，或通過(guò)對(duì)數(shù)放大器實(shí)現(xiàn)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換， 顯示出被測(cè)樣品的濃度C值。

圖Ⅱ-5-14 752型分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)原理圖

圖Ⅱ-5-15 752型分光光度計(jì)光學(xué)系統(tǒng)圖 1.鎢燈;2.濾色片;3.氫燈;4.聚光鏡;5.進(jìn)狹縫;6.保護(hù)玻璃;7.反射鏡;8.準(zhǔn)直鏡;9.光柵;10.保護(hù)玻璃;11.出狹縫;12.聚光鏡;13.樣品;14.光門;15.光電管。

2.使用方法
752型分光光度計(jì)的外部面板如圖Ⅱ-5-16所示。
1) 將靈敏度旋鈕調(diào)到“1”檔(放大倍數(shù)最小)。
2) 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，鎢燈點(diǎn)亮，預(yù)熱30min即可測(cè)定。若需用紫外光則打開(kāi)“氫燈”開(kāi)關(guān)，再按氫燈觸發(fā)按鈕，氫燈點(diǎn)亮，預(yù)熱30min后使用。
3) 將選擇開(kāi)關(guān)置于“T”。
4) 打開(kāi)試樣室蓋，調(diào)節(jié)0%旋鈕，使數(shù)字顯示為“0.000”。
5) 調(diào)節(jié)波長(zhǎng)旋鈕，選擇所需測(cè)的波長(zhǎng)。
6) 將裝有參比溶液和被測(cè)溶液的比色皿放入比色皿架中。
7) 蓋上樣品室蓋，使光路通過(guò)參比溶液比色皿，調(diào)節(jié)透光率旋鈕，使數(shù)字顯示為100.0%(T)。如果顯示不到100.0%(T)，可適當(dāng)增加靈敏度的檔數(shù)。然后將被測(cè)溶液置于光路中，數(shù)字顯示值即為被測(cè)溶液的透光率。
8) 若不需測(cè)透光率，儀器顯示100.0%(T)后，將選擇開(kāi)關(guān)調(diào)至“A”，調(diào)節(jié)吸光度旋鈕，使數(shù)字顯示為“000.0”。再將被測(cè)溶液置于光路后，數(shù)字顯示值即為溶液的吸光度。
9) 若將選擇開(kāi)關(guān)調(diào)至“C”，將已知標(biāo)定濃度的溶液置于光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕使數(shù)字顯示為標(biāo)定值，再將被測(cè)溶液置于光路，則可顯示出相應(yīng)的濃度值。

圖Ⅱ-5-16 752型分光光度計(jì)面板圖
1.數(shù)字顯示器; 2.吸光度調(diào)零旋鈕; 3.選擇開(kāi)關(guān); 4.濃度旋鈕; 5.光源室; 6.電源室; 7.氫燈電源開(kāi)關(guān); 8.氫燈觸發(fā)按鈕; 9.波長(zhǎng)手輪; 10.波長(zhǎng)刻度窗; 11.試樣架拉手; 2. 100%T旋鈕; 13. 0%T旋鈕; 14. 靈敏度旋鈕; 15. 干燥器。
3.注意事項(xiàng)
1) 測(cè)定波長(zhǎng)在360nm以上時(shí)，可用玻璃比色皿;波長(zhǎng)在360nm以下時(shí)，要用石英比色皿。比色皿外部要用吸水紙吸干，不能用手觸摸光面的表面。
2) 儀器配套的比色皿不能與其它儀器的比色皿單個(gè)調(diào)換。如需增補(bǔ)，應(yīng)經(jīng)校正后方可使用。
3) 開(kāi)關(guān)樣品室蓋時(shí)，應(yīng)小心操作，防止損壞光門開(kāi)關(guān)。
4) 不測(cè)量時(shí)，應(yīng)使樣品室蓋處于開(kāi)啟狀態(tài)，否則會(huì)使光電管疲勞，數(shù)字顯示不穩(wěn)定。
5) 當(dāng)光線波長(zhǎng)調(diào)整幅度較大時(shí)，需稍等數(shù)分鐘才能工作。因光電管受光后，需有一段響應(yīng)時(shí)間。
6) 儀器要保持干燥、清潔。