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計量論壇

標題: 酶標儀的維修實例及使用探討 [打印本頁]

作者: xccyp 時間: 2008-4-5 10:25
標題: 酶標儀的維修實例及使用探討
酶標儀的維修實例及使用探討
　酶標儀在實際應(yīng)用中很廣泛, 如應(yīng)用在臨床鑒別乙肝兩對半, HIV 等很多方面。在臨床實驗方面應(yīng)用在鑒定DNA 等許多方面, 可以說它是臨床及醫(yī)學(xué)實驗不可或缺的基礎(chǔ)設(shè)備。
故障一: 測量的結(jié)果重現(xiàn)性不好, 即使用空板測量誤差也在允許的范圍之外。
故障分析: 檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒有問題, 檢查判定公式也沒有問題, 檢查光路也沒有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒有卡到位, 造成微板在測量時在機內(nèi)晃動影響測量結(jié)果不準。

作者: xccyp 時間: 2008-4-5 10:29
故障二: 測量結(jié)果OD 值偏低。
故障分析: 排除完燈的能量值偏低后, 檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵, 用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾
干后故障排除。
測試方法: 酶標儀的儀器指標在最佳狀態(tài), 就儀器的精度測試和儀器的線性度介紹幾種測試方法:
精度測試: 該過程可被用于檢測不同微板之間的測量精度。使用新制備的在011 % TWEEN20 中
的橘黃色甲基填充微孔, 在每個微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個光密度范圍, 首先確保每孔注入200mL 液體, 使用492 nm 慮光片測量至少3, 對每一微孔進行下列計算: (1) 平均OD 值;(2) 最高和最低值; (3) 平均值。最高和最低值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在01000 到21000Abs。同一孔平均值, 最高值和最低值之間的差值應(yīng)該在+ / - 110 %和+ / - 01010 OD 范圍內(nèi)。
讀數(shù)范圍在21000 到31000Abs 同一孔平均值, 最高和最低值之間的差值應(yīng)在+ / - 110 %和+ /01005OD 值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在31000Abs 以上時準確度不符合要求。儀器線性度: 儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nm 處測量在011 %
TWEEN20 中的橘黃色甲基的稀釋系列, 具體方法如下: 在參考光密度計上測量被稀釋的溶劑, 畫出D 值對已知濃度的點圖, 并畫出通過這些點的最好的直線。將從系列稀釋中測得的吸光度值與該圖比較從而計算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250μL , 對每種稀釋至少使用兩個樣本, 以便降低因加樣引起的誤差。
測量微板使用精確測量模式, 利用測量得到的平均OD 值和每個樣本的已知濃度畫一條OD 濃度的曲線, 從系列稀釋中測得的吸光值與該曲線比較從而計算出各稀釋度的濃度。對光度記和本儀器,比較計算的濃度,不準確度不應(yīng)大于以下,使用標準濾光片492nm 時吸光度在01000～21000Abs + / - 1 %、21000～31000Abs + / - 115 %。使用梯度濾光片2 nm時, 吸光度在01000～21500Abs + / - 2 %。

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